内毒素是革兰氏阴性菌的细胞壁成分,又称为“热原”。内毒素也称作脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS),因为它由多糖和脂质部分共价连接组成,是革兰氏阴性菌细胞壁的主要组成成分。在正常人体内,微量的内毒素对机体的免疫调节及抗肿瘤起着重要的作用,过量的内毒素可被肝脏清除从而使血液中的内毒素含量保持在较低水平。如果肝功能严重受损或者内毒素的含量超过了肝脏的解毒能力,经肠道吸收的内毒素就可通过肝脏进入体内循环形成内毒素血症,进而导致发热、多种器官功能衰竭甚至死亡。
此外内毒素广泛存在我们的试剂耗材和样品之中,是生物医学试验和医药制品中的一大污染源,是蛋白、核酸、多糖等生物大分子纯化过程中最令人头疼的杂质之一。内毒素对哺乳动物的免疫系统具有极强的刺激性,极微量的内毒素即可引起动物机体发热甚至死亡,对动物细胞有很强的毒性,严重影响着各种体内外试验和药物的安全性。为了保证生物医学试验的成功率、可靠性,生物医药制品的安全性、有效性,彻底地去除样品和溶液中的内毒素成为了科学家们必须克服的难题。
综上针对内毒素分子的结构特点,合成偶联有分子簇功能基的内毒素层析介质,从而选择性将生物制品中的内毒素的吸附去除。
1、技术参数:
介质 |
Endotoxin Capture 4FF |
基架 |
高交联4%琼脂糖 |
功能基团 |
氨基酸分子簇 |
平均颗粒大小 |
90±5 um(45-165 um) |
适合纯化对象 |
蛋白、多肽、抗体等 |
耐压 |
0.3 MPa |
流速范围 |
>150 cm/h |
pH稳定性 |
pH5-10,可耐受碱液条件再生 |
保存温度 |
4-28 ℃ (勿冻存) |
保存溶液 |
20%乙醇 |
2、内毒素层析介质在血浆体系中使用效果
3、内毒素层析介质清洗条件及再生条件
内毒素层析介质先用生理盐水(10倍体积)冲洗,然后依次经过0.2 M NaOH(含20%乙醇)(10倍体积)、1.5 M NaOH淋洗(10倍体积),最后用无热原水冲洗至中性。
4、影响内毒素去除效率的因素
此层析介质是通过静电作用,疏水作用,氢键作用和分子之间的相互作用等多种因素共同作用的。在实验中存在若干因素可能会影响内毒素的吸附效率,如:缓冲液的pH值,内毒素的浓度,接触时间,离子强度,温度以及样品的特性等。
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